技術摘要
本發明提供黴菌抑制力的體外篩檢方法，包含：
- 提供呼吸道檢體樣本；
- 將該呼吸道檢體樣本以1.5倍至5倍體積生理食鹽水稀釋，得到檢測樣本；
- 將產孢性絲狀黴菌之成熟孢子種入檢測樣本，於28±2°C及37±2°C培養約24至36小時；
- 計算產孢性絲狀黴菌在檢測樣本中於28±2°C的第一發芽率、於37±2°C的第二發芽率，當第一發芽率高於34%、或第二發芽率高於20%時，判定為陽性反應，顯示該受試者為呼吸道真菌感染的高風險患者。
本發明亦提供前述體外篩檢方法的套組。前述篩檢方法可為免疫低下或免疫不健全的呼吸道真菌感染高風險患者提供快速檢測，及早預防或進行治療。
現有技術描述、問題及其缺陷
侵襲性麴菌病 (IA) 的診斷具有挑戰性，因為臨床症狀通常是非特異性的，且傳統診斷效果不彰。目前有幾類檢測診斷方法，其缺點如下：
- 一旦確定感染，斷層掃描 (CT) 掃描等方法僅顯示典型特徵，而特定特徵可能是短暫的。
- 檢測半乳甘露聚醣 (gm) 和 β-d-葡聚醣，或檢測特定蛋白質/抗原的血清學檢測，具陽性預測值 (PPV)不高，適用於排除IA而不是診斷。
- 這些限制導致發展PCR基礎的檢測方法，檢測患者樣本中的真菌 DNA。然而，由於從血液樣本中回收的少量真菌 DNA 和兒科中通常可用的相對較小的血量，這種測定在檢測的極限下運作。
本技術發明之目的及達成功效
本方法為非侵入性24小時快篩技術，直接測試個案呼吸道沖洗液抑制黴菌孢子發芽的表現。將過濾樣本加入具活性孢子之試管或 96 孔盤等容器，適溫培養24小時，即可以ELISA reader讀取數據，與對照組比較，判讀為陽性或陰性反應。技術上，操作簡便，省工省時，可同步操作大量樣本，24小時後，直接以ELISA reader讀取數據，無須抗原抗體反應。此方法非侵入性，只需呼吸道沖洗液樣本，無須不易取得的病灶檢體，不受初期病徵表現不具特異性、血液培養不會生長、缺乏夠敏感之分子生物學診斷方法（偵測抗原、PCR皆不盡理想）之限制。
相關專利資訊
中華民國專利證書號：I903264
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